檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄
抗生素、甲硝唑測(cè)試
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對(duì)應(yīng)法規(guī):化妝品衛(wèi)生規(guī)范2007
CNAS認(rèn)可項(xiàng)目:是
- 1 范圍
本規(guī)范規(guī)定了測(cè)定祛痘除螨類化妝品中鹽酸美滿霉素、二水土霉素、鹽酸四環(huán)素、鹽酸
金霉素、鹽酸多西環(huán)素、氯霉素6 種抗生素和甲硝唑的高效液相色譜法。
本規(guī)范適用于祛痘除螨類化妝品中鹽酸美滿霉素、二水土霉素、鹽酸四環(huán)素、鹽酸金霉
素、鹽酸多西環(huán)素、氯霉素和甲硝唑含量的測(cè)定。
2 方法提要
鹽酸美滿霉素、二水土霉素、鹽酸四環(huán)素、鹽酸金霉素、鹽酸多西環(huán)素、氯霉素和甲
硝唑在268nm 處有紫外吸收,可用反相高效液相色譜分離,并根據(jù)保留時(shí)間和紫外光譜圖
定性,峰面積定量。各組分的檢出限及取1g 樣品時(shí)的檢出濃度見表1。
表1 各組分的檢出限和檢出濃度
物質(zhì)名稱
鹽酸美
滿霉素
甲硝
唑
二水土
霉素
鹽酸四
環(huán)素
鹽酸金
霉素
鹽酸多
西環(huán)素
氯霉
素
檢出限(ng) 50 50 1 1 1 1 1
定量下限(ng) 150 150 3.3 3.3 3.3 3.3 3.3
檢出濃度(μg/g) 50 50 1 1 1 1 1
最低定量濃度(μg/g) 150 150 3.3 3.3 3.3 3.3 3.3
3 試劑
3.1 甲醇,色譜純。
3.2 乙腈,色譜純。
3.3 草酸,分析純。
3.4 鹽酸(0.1mol/L):取優(yōu)級(jí)純濃鹽酸(ρ20=1.19g/mL)8.3mL 加水至1L。
3.5 混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:分別準(zhǔn)確稱取鹽酸美滿霉素、二水土霉素、鹽酸四環(huán)素、鹽酸金
霉素、鹽酸多西環(huán)素、氯霉素、甲硝唑各0.1000g,用少許甲醇(3.1)及鹽酸(3.4)溶解,
移入100mL 容量瓶中,甲醇定容至刻度,搖勻,配成各組分質(zhì)量濃度為1.00g/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)
溶液。
4 儀器
4.1 高效液相色譜儀,具二極管陣列檢測(cè)器,色譜處理機(jī)或色譜工作站。
4.2 微量進(jìn)樣器或自動(dòng)進(jìn)樣裝置。
4.3 超聲波清洗器。
5 分析步驟
5.1 樣品預(yù)處理
準(zhǔn)確稱取樣品約1g 于10mL 具塞比色管中,加入甲醇(3.1)+鹽酸(3.2)=1+1 的混合
溶液至刻度,振搖,超聲提取20min~30min。經(jīng)0.45μm 濾膜過濾,濾液作為待測(cè)溶液備用。
253
5.2 色譜參考條件
色譜柱:C18 柱,250mm×4.6mm I.D.,5μm;
檢測(cè)器:二極管陣列檢測(cè)器,檢測(cè)波長268nm;
流動(dòng)相:0.01mol/L 草酸溶液(磷酸調(diào)節(jié)水溶液的pH至2.0)+甲醇+乙腈=67+11+22(HPLC
分析前,經(jīng)0.45μm 濾膜過濾及真空脫氣);
流量:0.8mL/min;
柱溫:室溫。
5.3 校準(zhǔn)曲線的制備
準(zhǔn)確移取不同體積的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.5)于10mL 具塞比色管中,用流動(dòng)相稀釋至刻
度,搖勻。經(jīng)0.45μm 濾膜過濾備用。在設(shè)定色譜條件下,分別取10μL 進(jìn)行分析。根據(jù)標(biāo)
準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度和峰面積繪制校準(zhǔn)曲線。
5.4 樣品測(cè)定
在設(shè)定的色譜條件下進(jìn)10μL 樣品溶液(5.1)進(jìn)行分析,若樣品含量過高,應(yīng)用流動(dòng)相
稀釋后測(cè)定。根據(jù)峰面積,從校準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)成分的質(zhì)量濃度。
6 計(jì)算
ρ×V
ω(抗生素、甲硝唑)=
m
式中:ω(抗生素、甲硝唑)——化妝品中抗生素、甲硝唑的質(zhì)量分?jǐn)?shù),μg/g;
ρ——測(cè)試溶液中抗生素、甲硝唑的質(zhì)量濃度,mg/L;
V——樣品定容體積,mL;
m——樣品取樣量,g。
7 色譜圖
圖1 抗生素、甲硝唑的色譜圖
1:鹽酸美滿霉素;2:甲硝唑;3:二水土霉素;4:鹽酸四環(huán)素;
5:鹽酸金霉素;6:鹽酸多西環(huán)素;7:氯霉素
254
SGS福建
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