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類胡蘿卜素(carotenoids)是構(gòu)成植物葉、花和果實顏色的重要成分之一,只能由植物或微生物合成,是人體必需的營養(yǎng)成分。在植物中,類胡蘿卜素可以協(xié)助吸收光能;在動物體內(nèi),類胡蘿卜素具有清除自由基、延緩衰老等功能。因此,類胡蘿卜素的種類和含量是評估水果和蔬菜品質(zhì)的重要參數(shù)。
葉黃素(Lutein)屬于類胡蘿卜素,是一種抗氧化劑,主要存在于蔬菜中。葉黃素能降低游離基在人體內(nèi)的傷害,從而防止機體衰老引發(fā)的各種疾病等。
番茄紅素(lycopene from tomato)屬于類胡蘿卜素,是天然色素。主要存在于西紅柿的成熟果實中。番茄紅素是最強抗氧化劑之一。番茄紅素能清除機體中的自由基,也可治療各種因衰老帶來的疾病等。
β-胡蘿卜素(β-Carotene)屬于類胡蘿卜素,是橘黃色脂溶性化合物及天然色素。β—胡蘿卜素是一種抗氧化劑,具有解毒作用,具有抗癌,抗氧化等功效,也能防止衰老帶來的各種疾病。
一、測定方法
采用乙醇或丙酮提取比色法測定類胡蘿卜素、葉黃素、番茄紅素、β-胡蘿卜素含量
二、實驗原理
類胡蘿卜素提取液在645和663nm2個波段下的吸光值很小,因此用紫外分光光度計直接測定出443,472 和502nm3個波段下葉黃素、番茄紅素、β-胡蘿卜素的吸光值,然后用上述3種色素的吸光值,借助紫外分光光度計測定出類胡蘿卜素提取液在440,645,663nm處的吸光值。
三、器材及試劑
分光光度計等;
石油醚、丙酮、無水硫酸鈉等。
四、實驗步驟
①樣品處理
稱取5g樣品,研磨充分,按一定比列加入石油醚、丙酮溶液及石英砂,提取類胡蘿卜素。溶液反復(fù)過濾,取濾色,暗處保存待用。
②標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
分別精確配制1μg/ml的葉黃素溶液、1μg/ml的番茄紅素溶液和1μg/ml的β-胡蘿卜素溶液,超濾后上機。進(jìn)樣量分別為4,8,10,12,16,20μl,經(jīng)數(shù)據(jù)系統(tǒng)自動處理,折算為相同體積不同樣液的質(zhì)量濃度,并以樣液質(zhì)量濃度為X軸、峰面積為Y軸分別制作葉黃素、番茄紅素、β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)曲線,建立回歸方程。
③樣品測定
取制備好的樣液10μl注入高效液相色譜儀,在前述測定條件下記錄葉黃素、番茄紅素、β-胡蘿卜素的峰面積,依保留時間分別通過標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣液中各組分的質(zhì)量濃度,用外標(biāo)法計算各組分含量。
五、結(jié)果分析
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線及吸光值分別計算類胡蘿卜素總量、番茄紅素、β- 胡蘿卜素濃度。


